1.採水
バケツから採水します。
採水量は水の濁り具合で変化します。2.カートリッジ型フィルターによる濾過
シリンジを使って、カートリッジ型フィルタ(ステリベックス等)を用いて、ろ過します。
3.DNA抽出試薬の注入
フィルタに、市販の抽出試薬を注入します。4.ボルテックス
撹拌のため、ボルテックスなどで容器を振動させます。5.カートリッジの注入口側から排出
フィルタから、抽出液を取り出します。6.中和
抽出液を中和します。7.遠心(残渣の除去)
藻などの不要物を遠心分離機などの用いて分離します。8.DNA溶液
分離した上澄み液を「試料」として分離します。
9.DNA溶液と増幅試薬の混合
PCR試薬(マスターミックス)と混合します。10.マイクロ流路チップに注入
測定用チップに導入します。11.マイクロ流路チップをPCR装置にセット
PicoGene®PCR1100にマイクロ流路チップ挿入しフタを閉じます。12.リアルタイムPCRで環境DNAを検出
PicoGene®PCR1100のスタートボタンを押して測定開始。
約15分で分析が完了します。
PCRに供するサンプルを採取・抽出する方法として、以下のような作業が参考になります。